優(yōu)爾普儀器歡迎您的到來,我們專注實驗室水處理、分析、檢測儀器行業(yè)十八年,期待與您的合作!
服務(wù)顧問QQ:3556531855

優(yōu)爾普儀器微信公眾號

優(yōu)爾普微信公眾號

微信公眾號掃碼關(guān)注 熱門資訊

酶底物法檢測水中大腸菌群實驗操作步驟詳解

發(fā)布時間:2019-10-11 12:34:00  來源:優(yōu)爾普儀器  瀏覽量:4385

本文共計有995個文字,預(yù)計閱讀時間4分鐘

關(guān)鍵詞:酶底物法檢測(www.jhlsmc.com)

[摘要]:酶底物法檢測大腸菌群是納入國家標準的新方法,操作簡便快捷,但其具體操作方法還未全面普及,本文就來和大家分享酶底物法檢測大腸菌群的實驗操作步驟。

  水中大腸菌群的檢測是人類生活飲用水安全的保障,能有效預(yù)防人體被大腸菌群感染。我國早前檢測水質(zhì)大腸菌群采用的方法是平皿計數(shù)法,此方法操作較為復(fù)雜,實驗人員也需要有較高的技術(shù)素養(yǎng),普及實施較難。

  酶底物法(Defined Substrate Technology,DST)是目前全球都在廣泛使用的大腸菌群檢測方法,近些年來我國也開始嘗試引進使用,并于2018年將此方法納入國標,該方法操作簡便快捷,時間周期短,數(shù)據(jù)準確,不需要有嚴格的實驗條件即可進行,對操作人員要求也不高,下面優(yōu)爾普就來介紹一下酶底物法檢測大腸菌群的具體步驟。

酶底物法檢測大腸菌群儀器酶底物法檢測大腸菌群儀器

酶底物法檢測大腸菌群操作方法

1、工作原理

  酶底物法是在選擇性培養(yǎng)基上產(chǎn)生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)的細菌群組,其能分解色原底物釋放出色原體,使培養(yǎng)基呈顏色變化,以此來檢測水中的大腸菌群。

2、立科酶底物法簡介

  立科酶底物法使用Colitech試劑進行檢測,這種試劑符合《生活飲用水標準檢測方法》,其采用GB/T5750.12-2006中固定底物技術(shù)的MMO-MUG培養(yǎng)基,當試劑加入含有總大腸菌群細菌組的水樣,目標細菌在含有固定底物ONPG-MUG的培養(yǎng)基中繁殖,大腸菌群細菌組產(chǎn)生的特異性生物酶β-半乳糖苷酶能分解MMO-MUG培養(yǎng)基中的固定色原底物ONPG,產(chǎn)生特征性黃色熒光,同時水樣中大腸埃希氏菌產(chǎn)生特異性B-葡萄糖苷酸酶能分解MMO-MUG培養(yǎng)基中的固定熒光底物MUG,產(chǎn)生特征性藍色熒光,以此定性檢測水中大腸菌群和大腸埃希氏菌。

  當水樣中少數(shù)非目標細菌的生物酶試圖和ONPG、MUG反應(yīng)并干擾檢測結(jié)果時,Colitech培養(yǎng)基中特殊配方的基質(zhì)會抑制其反應(yīng)過程,控制假陽性的產(chǎn)生。同時,這些特殊培養(yǎng)基質(zhì)可以有效促使目標細菌的生物酶和固定底物反應(yīng),所以假陰性發(fā)生率比傳統(tǒng)方法更低。

3、儀器與試劑

儀器:培養(yǎng)箱(36±1℃)、高壓蒸汽滅菌器、定量盤(51孔和97孔)、立科程控定量封口機、試管、稀釋瓶、移液管、量筒.

酶底物法檢測儀器及其配置酶底物法檢測儀器及其配置

試劑:立科Colitech酶底物法檢測試劑,滅菌稀釋水.

4、酶底物法檢測操作步驟

1)水樣稀釋

  檢測實驗所需水樣為100ml,若水樣污染嚴重可進行稀釋(取10ml水樣加入到90ml的滅菌稀釋水中,必要時可加大稀釋度)。本實驗取20個水樣分別進行總大腸菌群(1-10號)和糞大腸菌群(11-20號)的檢測。

大腸菌群水樣取樣瓶大腸菌群水樣取樣瓶

2)定性試驗

  用100ml的無菌稀釋瓶量取100ml水樣,加入專用培養(yǎng)基,搖晃至溶解,以36±1℃的溫度在培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時。

3)定量試驗

  用100ml的無菌稀釋瓶量取100ml水樣,加入專用培養(yǎng)基,搖晃至溶解,將該溶液導(dǎo)入51孔(總大腸菌群)和97孔(糞大腸菌群)的定量盤內(nèi),然后將定量盤放入立科程控定量封口機封口,以36±1℃的溫度在培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時。

酶底物法檢測水質(zhì)大腸菌群操作具體流程:http://www.jhlsmc.com/news/175.html

5、結(jié)果判定

酶底物法檢測大腸菌群對比酶底物法檢測大腸菌群對比

1)定性反應(yīng)

  對水樣培養(yǎng)24小時后進行結(jié)果判定,如顏色變成黃色,則判定為陽性,表示水中含有大腸菌群,若水樣未發(fā)生顏色變化,則判定為陰性,表示水樣中不含大腸菌群。定性結(jié)果以大腸菌群檢出或未檢出作報告。

2)定量反應(yīng)

  對培養(yǎng)24小時后定量盤內(nèi)的水樣進行結(jié)果判定,若孔穴內(nèi)的水樣有黃色反應(yīng)則表示該孔穴中含有大腸菌群,總大腸菌群對照51孔定量盤MPN表,糞大腸菌群對照97孔定量盤MPN表,結(jié)果以MPN/L報告。若所有孔穴均未產(chǎn)生黃色反應(yīng),以未檢出作報告。

  有關(guān)實驗室使用酶底物法檢測水中大腸菌群的方法步驟就和大家分享到這里了,酶底物法操作簡便,數(shù)據(jù)準確,二次污染小,無需再無菌室內(nèi)操作,滿足GB5749-2006生活飲用水標準和GB8978-1996污水綜合排放標準,適用于源水、瓶裝水、飲用水、畜牧用水、廢水、再生水、食品水、醫(yī)療用水等各類水樣,目前已在國內(nèi)廣泛應(yīng)用。

標題:酶底物法檢測水中大腸菌群實驗操作步驟詳解      地址:http://www.jhlsmc.com/news/52.html
本站原創(chuàng)內(nèi)容、產(chǎn)品圖片未經(jīng)授權(quán)禁止以任何形式進行采集、鏡像、復(fù)制,否則將追究其責任!

在線詢價

獲取參數(shù)報價 銷售服務(wù)熱線:138-3803-7799 銷售服務(wù)QQ:3556531855
優(yōu)爾普客服微信號在線微信顧問
在線詢價
主站蜘蛛池模板: 亚洲伊人久久精品| 午夜时刻免费实验区观看| 久久中文字幕视频| 精品深夜av无码一区二区 | 白丝爆浆18禁一区二区三区| 天天干天天干天天| 亚洲国产欧美在线看片一国产| 久久福利资源网站免费看| 日日躁夜夜躁狠狠躁超碰97| 公和我做好爽添厨房| 91精品福利一区二区三区野战| 欧美一级片观看| 国产一级黄色片子| a级特黄的片子| 欧美videos娇小| 国产dvd毛片在线视频| AAA级久久久精品无码片| 欧美一级三级在线观看| 国产一区二区不卡老阿姨| aaaa欧美高清免费| 最近中文字幕大全高清视频 | 久久婷婷五月综合色欧美| 精品福利一区二区三区免费视频| 在线播放第一页| 久久精品国产亚洲av麻| 精品国产一区二区三区久久| 国产精品色拉拉免费看| 久久久久国产精品免费看| 男人j桶进女人p无遮挡在线观看 | 女人隐私秘视频黄www免费| 亚洲国产精品线观看不卡 | 晚上睡不着来b站一次看过瘾 | 中文无遮挡h肉视频在线观看| 狠狠综合久久久久尤物丿| 国产李美静大战黑人| 一本色综合久久| 欧美乱子伦xxxx| 午夜亚洲国产成人不卡在线| 色播在线永久免费视频网站| 成年免费视频黄网站在线观看 | 97福利视频精品第一导航|